即用型GibcoGeltrex基质进

#你问我答#即将进入优化阶段！

不过细胞系列内容还在继续，让我们今天来看看：胞外基质

（之前提出和细胞相关问题的朋友们，你们有福啦~）

Q1

Gibco?Geltrex?基质，胶原，AlgiMatrix?3D培养系统和CTS?Cellstart?基质之间的一般性区别是什么？

Gibco?Geltrex?基质与胶原（大鼠尾与牛）可作为包被溶液或3D凝胶基质来使用。

CELLstart?底物作为一种不含异外源性物质的包被基质，专为ESC的相关应用而研发（作为动物源性的Gibco?Geltrex?基质或动物源性的Matrigel?基质的一种替代品底物）。

AlgiMatrix?基质是为一种3D支架类的基质，它不支持并不为细胞提供粘附的基础，但而是为细胞球生长提供一个良好的生长环境，后续应用中也可方便易于细胞球的收取操作用于后续应用。

Q2

如何将细胞与Gibco?Geltrex?基质解离？

如果您希望从基质上解离出中取出细胞进行培养，我们推荐您首先冲润洗细胞，之后使用胰酶/EDTA，TrypLE?试剂，或使用低葡糖DMEM配制的U/mL胶原酶和U透明质酸酶溶液解离细胞。

如果您希望对从基质上解离出中取出的细胞进行细胞膜表面标志物的染色，我们推荐您以机械方法解离取出细胞，如剧烈冲润洗或仔细刮下。

请注意，如果细胞培养于2D基质的条件下，则解离取出后细胞表型可能发生改变。

Q3

使用即用型Gibco?Geltrex?基质进行预包被时，观察到漂浮碎片属正常情况么？

是的，这是正常情况。我们在产品开发过程中也见到了类似情形。

请在预包被处理后吸去Gibco?Geltrex?基质溶液，再按常规操作加入细胞。

我们使用即用型成品Geltrex?基质预先包被的平板来培养H9人体胚胎干细胞，在进执行预包被步骤时有过类似发现。

Q4

当细胞在AlgiMatrix?基质中生长3至4天后达到某一密度时，我能传代细胞吗？

可以，您可使用钙结合液，Versene（乙二胺四乙酸）或柠檬酸钠来溶解基质。

剩余的细胞球可通过TrypLE?试剂解离下来，计数，并在其他培养器皿瓶，或新的型AlgiMatrix?基质海绵体中进行扩增。

随试剂盒对应附赠的说明手册中对这些操作步骤进行了图解说明。

Q5

使用AlgiMatrix?基质3D培养系统时，最佳的细胞生长条件是什么？

这一支架结构对于形成3D细胞球非常有帮助，因为它能够最大化地允许辅助细胞间的相互作用。

用户可基于所用细胞类型来扩增建立的细胞系扩增产物，细胞球的尺寸可增至个细胞左右。

已建立的细胞系通过增加细胞球的大小（细胞球的大小可增至个细胞左右，取决于细胞类型）进行扩增。

在以三维形式条件下培养超过1-2周的原代细胞和已所建立的细胞系在1-2周的培养后均会发生分化。

Q6

如果AlgiMatrix?基质是从褐海藻中提取出来的，那么它如何能够满足制药原料的标准，并避免出现过大的批次间差异？

藻酸盐是AlgiMatrix?基质由其制成的主要成份物质，具有非常亲水的表面，含脂质的细胞脂质膜和乃至分子都不会粘附其上。

正常细胞在AlgiMatrix?基质中会聚集形成细胞球并产生分化结构成结构，但扩增会受到限制，因为大多数正常细胞数目的增加需要以粘附为前提。

癌细胞能够在不粘附的情况下保持扩增殖，在AlgiMatrix?基质中也是如此（一个例外是胚胎干细胞，这一类型的该细胞在AlgiMatrix?基质中会增殖为类以拟胚体进行扩增）。

不过，软琼脂与AlgiMatrix?基质之间的一个主要区别在于：软琼脂是一种水凝胶，而AlgiMatrix?基质则是拥有较大孔径尺寸的海绵体——细胞在AlgiMatrix?基质中能够比在水凝胶（软琼脂）包裹下更容易和更迅速地进行生长。

从正常细胞中区分癌细胞的传统经典方法是观察细胞的扩增殖；癌细胞（如HepG2肝癌细胞）会形成不断扩增的细胞球，而正常细胞所形成细胞球的大小尺寸和数量都不会增加。

Q7

为何Gibco?Geltrex?基质适用于粘附相关的研究，而Gibco?AlgiMatrix?3D培养系统不适用？

Gibco?Geltrex?基质是含有细胞粘附所需的胶原IV，层粘连蛋白及其他基质蛋白和生长因子的基底膜抽提物。

AlgiMatrix?基质只含有不具细胞粘附促进能力的藻酸盐。藻酸盐海绵体中没有能与细胞相互作用的成份。

Q8

使用即用型Geltrex?基质进行预包被时，观察到漂浮碎片属正常情况吗？

是的，这是正常情况。我们在产品开发过程中也见到了类似情形。请在预包被处理后吸去Geltrex?溶液，再按常规操作加入细胞。

我们使用即用型Geltrex?基质预先包被的成品平板来培养H9人体胚胎干细胞，在进执行预包被步骤时有过类似发现。

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